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當(dāng)前位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 支原體檢測(cè)盒及標(biāo)準(zhǔn)品 > 常規(guī)支原體PCR檢測(cè)試劑盒 > 11-8025常規(guī)PCR Kit（一步法）描述：VenorGeM支原體污染檢測(cè)試劑盒（一步法）支原體PCR檢測(cè) 采用常規(guī)PCR方法，并包含PCR需要的所有試劑。其中引物和dNTP、DNA聚合酶、內(nèi)控對(duì)照都包含在PCR預(yù)混液（Mix）干粉中。重懸緩沖液復(fù)溶Mix干粉，分裝到PCR管中，分別加入細(xì)胞上清（陰性對(duì)照）、復(fù)溶的陽(yáng)性對(duì)照DNA和待測(cè)樣品（細(xì)胞上清或提取的樣本DNA），進(jìn)行PCR反應(yīng)。常規(guī)PCR Kit（一步法）
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詳細(xì)介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 產(chǎn)地類(lèi)別 | 進(jìn)口 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
常規(guī)PCR Kit （一步法）
Venor®Gem OneStep
品名 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
常規(guī)PCR Kit （一步法） Venor®Gem OneStep | 11-8025 | 25次/盒 | 詢(xún)價(jià) |
11-8050 | 50次/盒 | 詢(xún)價(jià) | |
11-8100 | 100次/盒 | 詢(xún)價(jià) | |
11-8250 | 250次/盒 | 詢(xún)價(jià) |
常規(guī)PCR Kit（一步法）介紹：
常規(guī)PCR法：是根據(jù)支原體核糖體16s-23s rRNA的特異保守序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)待檢樣本DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的大小分析作出診斷。
優(yōu)點(diǎn)：①靈敏度高，特異性好。②時(shí)間短，2-3小時(shí)出結(jié)果。③符合歐洲藥典。④操作簡(jiǎn)單。
缺點(diǎn)：①對(duì)于已做支原體滅活處理的樣品，由于支原體DNA仍舊存在其中，PCR結(jié)果會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。（可用培養(yǎng)法做補(bǔ)充驗(yàn)證）。②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大（由于引物及內(nèi)在設(shè)計(jì)不同），需謹(jǐn)慎選擇，盡量在專(zhuān)業(yè)人員推薦指導(dǎo)下使用。
『支原體常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒』介紹：
德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒，依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別，分一步法和經(jīng)典法兩類(lèi)。此兩類(lèi)試劑盒較全球其他廠家同類(lèi)產(chǎn)品，具有以下*的優(yōu)點(diǎn)：
①高特異性，270bp左右的一條陽(yáng)性對(duì)照條帶，涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果易于觀察。（使用MB的試劑盒，下表列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性。根據(jù)16s rRNA序列的同源性比對(duì)，該試劑盒可檢測(cè)出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。）
②高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。
③試劑盒含內(nèi)控對(duì)照，可防止假陰性的發(fā)生。
④符合歐洲藥典要求。
常規(guī)PCR Kit（一步法）適用范圍：
A. 科研用戶(hù)，細(xì)胞上清的篩查可選用MB公司生產(chǎn)的支原體常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒（一步法）。（詳見(jiàn)下文）
【Venor® Gem OneStep (貨號(hào):11-8050)】或【Venor® Gem Advance (貨號(hào): 11-7096)】
B. 對(duì)于需遵循藥典要求的生物制藥企業(yè)，可選用MB公司生產(chǎn)的支原體常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒（經(jīng)典法）。
【Venor® Gem Classic(貨號(hào): 11-1050) 】+ Taq酶 (貨號(hào): 53-1050)】
或【Venor® Gem Classic (貨號(hào): 11-1050G)】
特點(diǎn)：
1. 內(nèi)控對(duì)照已加在預(yù)混液中，無(wú)需另外配置，使用便捷。
2.高特異性，僅一條陽(yáng)性對(duì)照條帶，即可涵蓋所有可能感染細(xì)胞的支原體物種。
操作簡(jiǎn)單，易于觀察。
3.高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。
4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測(cè)出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。
操作步驟：
下列圖示以Venor® Gem OneStep?支原體?常規(guī)PCR?檢測(cè)試劑盒?(一步法)( 貨號(hào)：11-8050) 為例，具體產(chǎn)品操作以說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
第1步：樣本處理
第2步：試劑制備
第3步：PCR體系建立
第4步：?jiǎn)?dòng)PCR反應(yīng)
第5步：電泳結(jié)果分析
191bp為內(nèi)控對(duì)照條帶，表明PCR反應(yīng)正常。
當(dāng)樣本存在支原體污染時(shí)，由于內(nèi)控對(duì)照與支原體DNA存在競(jìng)爭(zhēng)，內(nèi)控對(duì)照條帶變?nèi)酰ɡ缰гwDNA＞103拷貝）。
陽(yáng)性對(duì)照中支原體DNA＞104拷貝，內(nèi)控對(duì)照條帶會(huì)*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測(cè)結(jié)果。
如果待測(cè)樣本對(duì)PCR產(chǎn)生抑制，則內(nèi)控對(duì)照條帶變?nèi)酰ê完幮詫?duì)照相比），此時(shí)應(yīng)先進(jìn)行DNA抽提（推薦使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒），然后再檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件
2~8℃至少12個(gè)月。復(fù)溶后必須在-18℃保存。
效期
1年6個(gè)月
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